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祝賀湖北省恩施土家族苗族自治州中心醫(yī)院訂購我司產(chǎn)品發(fā)表文章成功

更新時間:2025-10-10      瀏覽次數(shù):843

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標(biāo)題《絞股藍(lán)提取物通過調(diào)控lncRNA PICSAR對IL-1β誘導(dǎo)軟骨細(xì)胞損傷的保護作用及機制研究》

摘要:目的探討絞股藍(lán)提取物對白介素1β(IL-1β)誘導(dǎo)軟骨細(xì)胞損傷的作用及分子機制。方法 2020年10月—2021年4月于湖北省恩施土家族苗族自治州中心醫(yī)院進行實驗,將關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞隨機分為對照(NC)組、IL-1β組及絞股藍(lán)提取物低、中、高劑量組、IL-1β+si-con組、IL-1β+si-lncRNA PICSAR組、pcDNA-con+高劑量組、pcDNA-lncRNA PICSAR+高劑量組,分別對其進行干預(yù)水平;用細(xì)胞計數(shù)試劑盒8(CCK-8)檢測細(xì)胞活力,流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞凋亡情況,蛋白質(zhì)印跡(Western-blot)法檢測裂解的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Cleave-caspase-3)蛋白表達(dá)水平;酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)檢測丙二醛(MDA)水平和超氧化物歧化酶(SOD)、過氧化氫酶(CAT)活性;實時熒光定量PCR(RT-qPCR)檢測lncRNA PICSAR表達(dá)水平。

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細(xì)胞凋亡也可以用流式細(xì)胞儀觀察細(xì)胞光散射的變化來檢測。細(xì)胞發(fā)生凋亡時,由于胞漿和染色質(zhì)濃縮、核碎裂,產(chǎn)生凋亡小體。凋亡前期,染色質(zhì)皺縮,細(xì)胞密度增加;凋亡后期,細(xì)胞產(chǎn)生凋亡小體,細(xì)胞的光散射均會發(fā)生變化。

 

細(xì)胞周期與凋亡檢測試劑盒(Cell Cycle and Apoptosis Analysis Kit)采用了經(jīng)典的碘化丙啶染色(Propidium staining)方法對細(xì)胞周期與凋亡進行檢測分析。利用碘化丙啶能夠嵌入雙鏈DNA中,并使其產(chǎn)生熒光,并且熒光強度和雙鏈DNA的含量成正比的特性;結(jié)合細(xì)胞不同周期中,DNA含量的規(guī)則變化,可以區(qū)分細(xì)胞處于的周期和狀態(tài)。本試劑盒可用于組織細(xì)胞、貼壁或懸浮細(xì)胞的細(xì)胞周期與凋亡檢測(如用于組織的細(xì)胞周期與凋亡檢測,則須把組織消化成單細(xì)胞狀態(tài),才可進行檢測)。

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