信帆生物提供腺病毒包裝系統(tǒng)及病毒實驗！

腺病毒載體是以腺病毒為原型進行基因功能改造而成的無外殼的雙鏈DNA病毒，由于其具有宿主范圍廣、可感染分裂和非分裂細胞、高滴度制備、外源基因裝載容量大等優(yōu)點，重組腺病毒已越來越廣泛地被應用于基礎研究和研究試驗中，并成為世界上zui常用的基因治療載體之一。

病毒包裝系統(tǒng)及病毒實驗的優(yōu)點：

1、可感染的細胞種類多，宿主廣泛；
2、感染效率高，特別適合質(zhì)粒載體轉(zhuǎn)染效率低的細胞，如原代細胞、神經(jīng)細胞等，且目的蛋白表達水平高；
3、可包裝大片段的外源基因，高達10kb；
4、不整合到細胞染色體中，生物安全性高。
腺病毒包裝技術(shù)主要原理是將目的片段克隆到腺病毒表達載體上，表達載體和包裝質(zhì)粒通過重組導入腺病毒包裝細胞進行包裝，包裝好的病毒進一步進行擴增和滴度測定。

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AdMAX系統(tǒng)：
AdMax包裝系統(tǒng)是通過Cre/loxP 獲得重組病毒，這個過程發(fā)生在HEK293細胞中，從而避免在細菌中重組。將克隆了外源基因的腺病毒穿梭質(zhì)粒與攜帶了腺病毒大部分基因組的包裝質(zhì)粒共轉(zhuǎn)染HEK293細胞，利用Cre/loxP系統(tǒng)的作用實現(xiàn)重組，產(chǎn)生重組腺病毒。這個系統(tǒng)有多種優(yōu)勢，包括操作簡便、重組效率高、獲得的病毒產(chǎn)率高、目的基因的表達水平高（因為mCMV啟動子比hCMV啟動子強若干倍）等。
可根據(jù)不同的研究需求構(gòu)建腺病毒穿梭載體，如用于RNAi的腺病毒載體、用于基因過表達的腺病毒載體、用于啟動子活性研究的腺病毒載體等

技術(shù)流程:
1.獲得目的基因序列；
2.構(gòu)建病毒表達載體質(zhì)粒；
3.表達載體質(zhì)粒和包裝質(zhì)粒重組；
4.感染HEK293，包裝出病毒；
5.病毒擴增、濃縮；
6.滴度測定。

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